Será que a exatidão é o preço que estamos a pagar por resultados mais rápidos?

O que mais existe no mercado?

Estão também disponíveis no mercado outros métodos de teste rápido de micotoxinas, como os ensaios de imunoabsorção enzimática (ELISA). No entanto, os testes ELISA requerem uma curva de calibração em cada análise, o que pode demorar cerca de 20 minutos a produzir um resultado final. Por conseguinte, estes métodos só são viáveis quando várias amostras são analisadas em paralelo utilizando a mesma curva de calibração. Outro grupo de métodos de ensaio de micotoxinas são os métodos de ensaio de referência, incluindo a cromatografia líquida de alta resolução (HPLC), bem como a cromatografia líquida com deteção por espetrometria de massa em tandem (LC-MS/MS). Estes são métodos laboratoriais típicos associados a uma elevada exatidão e reprodutibilidade. A desvantagem destes métodos é o facto de necessitarem de pessoal altamente qualificado e de demorarem até um dia a apresentar um resultado analítico. Por conseguinte, não são adequados para aplicação num ponto de receção de um elevador de cereais.

A grande questão da exatidão

Quanto mais rápido for um método analítico, mais frequentemente surgirão preocupações sobre a sua exatidão. Então, qual é a exatidão dos testes LFD? Tanto a tecnologia LFD como os testes ELISA utilizam o princípio de deteção da reação anticorpo-antigénio, em que um anticorpo específico detecta um antigénio único, neste caso uma micotoxina, com uma determinada sensibilidade. Ambos os sistemas de teste são calibrados com materiais de referência certificados e os resultados são comparados com métodos de referência acreditados em estudos de validação exaustivos. No entanto, alguns métodos de teste podem não corresponder às expectativas do operador.

O que pode correr mal?

Uma amostragem correcta (ver caixa de texto) é a chave para produzir resultados de análise precisos. Grandes lotes de grãos (por exemplo, camiões ou barcaças cheios) devem ser analisados quanto à presença de micotoxinas antes de serem aceites numa instalação. É crucial que sejam recolhidas amostras representativas para a análise. Um dos factores mais significativos que pode influenciar um resultado analítico é a matriz do produto. Idealmente, os métodos de teste são desenvolvidos para analisar a contaminação por micotoxinas em qualquer tipo de amostra de alimento ou ração. No entanto, um fator limitativo é que diferentes amostras de alimentos para consumo humano ou animal podem ter diferentes componentes que podem interferir com o resultado analítico, dependendo da sua estrutura química e propriedades. Os testes rápidos baseados em anticorpos são frequentemente influenciados por certos componentes da matriz que podem ter um impacto importante na reação de ligação anticorpo-analito, produzindo potencialmente resultados questionáveis. Os fabricantes de kits de teste enfrentam o desafio de reduzir ou eliminar estas interferências através, por exemplo, do desenvolvimento de anticorpos específicos e da validação de matrizes. Outras fontes de erro podem ser factores ambientais, como a temperatura ambiente durante os testes. A reação de ligação anticorpo-antigénio - o princípio de deteção de todos os testes imunoquímicos - depende da temperatura. Para obter resultados exactos, os fabricantes desenvolveram incubadoras de testes para manter as temperaturas constantes, eliminando assim as interferências causadas por temperaturas flutuantes. Os operadores de testes analíticos devem ter formação adequada para administrar os testes com exatidão. Os testes LFD são os testes de micotoxinas mais fáceis de efetuar. A formação básica é suficiente para reduzir ao mínimo os erros dos operadores destes métodos.

Erro de amostragem

O erro total de um resultado analítico de texto de micotoxinas é a soma dos erros de amostragem, de preparação da amostra e analíticos. O erro de amostragem contribui para a maior parte do erro no resultado final. Isto deve-se ao facto de as micotoxinas se distribuírem de forma desigual nas amostras de grãos a granel, o que torna essencial a recolha de uma amostra representativa antes de prosseguir com a preparação da amostra e a medição propriamente dita. Para obter uma amostra representativa de um lote de amostras a granel, é necessário colher várias amostras incrementais em vários locais. Estas amostras elementares são então combinadas para formar uma amostra global e, após homogeneização e posterior divisão por um divisor mecânico, é colhida uma amostra analítica para posterior preparação da amostra. Estes procedimentos são descritos em planos de amostragem oficiais pelas autoridades, como a Comissão Europeia (CE 401/2006 & CE 519/2014). A grande influência no resultado analítico final torna essencial que o erro de amostragem seja reduzido ao mínimo. A forma mais simples de o conseguir é aumentar o número de locais de amostragem, bem como a dimensão das amostras incrementais dentro de um plano de amostragem.

Qual é a responsabilidade do fabricante do kit de ensaio?

O que pode um fabricante de kits de ensaio fazer para garantir que os resultados produzidos com os seus kits de ensaio são exactos e fiáveis? Em primeiro lugar, o fabricante de kits de teste tem de educar os utilizadores sobre a importância de uma amostragem correcta, uma vez que esta é crucial para a exatidão dos resultados. Em seguida, tem de provar a exatidão do seu kit de teste através da realização de um estudo de validação que siga as directrizes USDA GIPSA ou AOAC. O kit de teste pode ser apresentado a estes organismos oficiais para uma avaliação externa por terceiros que confirme o desempenho alegado do método analítico. Para essas validações por terceiros, o fabricante de um kit de ensaio deve incluir os dados de validação para as matrizes de amostra reivindicadas, a fim de garantir que o kit de ensaio funciona com exatidão nessas diferentes matrizes de amostra. Nos estudos de validação, são normalmente utilizadas várias fontes de amostras, por exemplo, amostras de milho de diferentes continentes, para demonstrar a fiabilidade do método analítico. Para melhorar ainda mais a robustez de um sistema de ensaio, os factores ambientais, como a temperatura, também devem ser eliminados ou tidos em conta. Isto pode ser feito através da utilização de uma incubadora para que o desenvolvimento do LFD ocorra sempre a uma temperatura constante e controlada.

Será que a exatidão é o preço que os cerealistas pagam por resultados rápidos?

Depois de observar as operações nos pontos de receção de cereais, é evidente que os testes rápidos de amostra única são os métodos de eleição. Os dispositivos de fluxo lateral cumprem claramente todos os critérios e, além disso, reduzem muitas fontes de erros de manuseamento devido à sua simplicidade. Seguindo regras claras e básicas, a rapidez não tem de ser obtida à custa da exatidão. Resultados fiáveis e precisos podem ser obtidos em menos de dez minutos e essa é a chave para analisar e avaliar eficazmente o grão de camião para camião num ponto de receção.