System szybkich badań przesiewowych przyczynia się do zmniejszenia liczby SE przenoszonych przez jaja w USA

Zakażenie Salmonellą Enteritidis* (SE) przenoszone przez jaja zostało drastycznie ograniczone w amerykańskim komercyjnym przemyśle jajczarskim. Po przypadkach w UE we wczesnych latach 70-tych, wybuch epidemii miał miejsce w 1979 roku w Nowej Anglii. Następnie, we wczesnych latach 80-tych, epidemia rozprzestrzeniła się w środkowo-atlantyckich stanach, a ostatecznie pojawiła się w południowo-zachodnich i pacyficznych regionach w latach 90-tych. Całkowita liczba przypadków SE w USA osiągnęła szczytowy poziom 10 200 w 1995 roku, ale spadła do 5 000 do 2005 roku. Wskaźniki zachorowalności w środkowo-atlantyckich stanach, wyraźnie najbardziej dotkniętym regionie, osiągnęły 9,1 na 100 000 w 1994 roku. Do 2007 roku poziom ten był niższy i wynosił 2,5 na 100 000 mieszkańców. Amerykańskie Centra Kontroli i Zapobiegania Chorobom przewidywały, że 5 333 potwierdzone przypadki SE stanowiły w rzeczywistości 170 000 przypadków w całym kraju, z czego 108 000 przypisywano spożyciu zakażonych jaj. Niezależnie od słuszności tych prognoz, opartych na szeregu kwestionowanych założeń, było oczywiste, że problem istniał, stymulując interwencję federalną.

Programy zapewnienia jakości jaj

Pod koniec lat 90-tych poszczególne stany wprowadziły Programy Zapewnienia Jakości Jaj, wymagające od producentów przestrzegania minimalnych standardów bezpieczeństwa biologicznego, chłodzenia po zapakowaniu, szczepień, badania stad pod kątem skażenia środowiska i kierowania jaj z zakażonych stad do wybicia i pasteryzacji. Eliminacja zakażeń przenoszonych pionowo przez kolejne pokolenia, począwszy od czystych linii do stad rodzicielskich, miała kluczowe znaczenie dla osiągnięcia znaczącego zmniejszenia częstości występowania SE w stadach. Krajowy Plan Doskonalenia Drobiu (NPIP) ustanowiony na początku lat trzydziestych XX wieku jest odpowiedzialny za koordynację działań federalnych, stanowych i branżowych w celu wyeliminowania zakażeń przenoszonych drogą wertykalną. Plan narzuca procedury operacyjne, zatwierdza testy diagnostyczne i certyfikuje wylęgarnie dostarczające jednodniowe pisklęta i pisklęta. Pierwotnie koncentrował się na zwalczaniu zakażeń Salmonella pullorum, obecnie NPIP zajmuje się SE w szczepach nieśnych, oprócz innych patogenów w szerokim zakresie gatunków ptaków. Przestrzeganie wymogów Krajowego Planu Doskonalenia Drobiu zapewnia dostawy komercyjnych piskląt zastępczych z wylęgarni certyfikowanych jako wolne od SE. Jest to zasadnicza podstawa wysiłków branży na rzecz zapobiegania SE w stadach komercyjnych. W 2003 roku jedna z ogólnokrajowych marek jaj wprowadziła rygorystyczny program zapobiegania SE obejmujący szczepienia i zwiększone bezpieczeństwo biologiczne wymagane od wszystkich franczyzowych producentów jaj. Wykorzystanie zestawów testowych z bocznym przepływem immunologicznym miało kluczowe znaczenie dla pomyślnego wdrożenia programu. Ponieważ stada były badane pięciokrotnie od dnia umieszczenia do końca drugiego cyklu produkcyjnego, wymagany był szybki test o odpowiednich parametrach zamiast konwencjonalnej procedury mikrobiologicznej BAM (Bacteriological Analytical Manual) Agencji Żywności i Leków (FDA).

RapidChek® SELECT™ - wysoce czuły test

Test immunologiczny przepływu bocznego RapidChek® SELECT™ firmy Romer Labs stał się standardową procedurą przesiewową w celu określenia obecności Salmonelli grupy D1 w wymazach z obornika lub w basenach z jajami. Procedura ta jest uznawana przez FDA za równoważną bardziej pracochłonnej i kosztownej metodologii BAM. Po wstępnej ocenie metody RapidChek® ustalono, że test wykazał czułość na poziomie 100%, co ma kluczowe znaczenie dla testu przesiewowego, który nie powinien dawać wyników fałszywie ujemnych. Równolegle w procesie zatwierdzania 141 izolatów Salmonelli z grupy D1 i 210 serotypów Salmonelli spoza grupy D1, swoistość testu została określona na 93 procent. Jest to ważny parametr, ponieważ fałszywie dodatni wynik testu w 45-tygodniowym stadzie liczącym 125 000 kur spowoduje znaczne koszty i zakłóci działalność. Stosując metodę BAM, komercyjne laboratorium zbadało 2412 próbek wymazów w 2010 roku, uzyskując 1477 "podejrzanych" kolonii wymagających dalszego badania. Z tego zestawu tylko dwie próbki z wynikiem SE zostały potwierdzone. Połączone wyniki z dwóch laboratoriów stanowych na środkowym zachodzie stosujących test RapidChek® w 2010 i 2011 roku dały 106 "przypuszczalnych" wyników pozytywnych z około 14 000 przebadanych wymazów. Potwierdzające testy bakteriologiczne zidentyfikowały 16 izolatów SE z rutynowych próbek dostarczonych przez producentów. Dane z laboratorium w zachodnim stanie, dotyczące 1 162 wymazów, porównały zdolność testu RapidChek® do wykrywania Salmonelli grupy D1 z konwencjonalnym testem mikrobiologicznym BAM. Zidentyfikowano jedenaście "przypuszczalnych" wyników pozytywnych przy użyciu testu immunologicznego z przepływem bocznym w porównaniu do trzech wyników pozytywnych SE przy zastosowaniu procedury BAM.

Uwagi praktyczne

Swoistość testu przesiewowego jest ważna z punktu widzenia potencjalnych strat finansowych. Obliczono, że jeśli fałszywie dodatni wynik testu środowiskowego został uzyskany w stadzie w obowiązkowym wieku od 40 do 45 tygodni, wstrzymanie sprzedaży jaj lub skierowanie ich do wybicia i pasteryzacji w ciągu czterech tygodni, podczas których przeprowadzane są testy potwierdzające, może kosztować nawet 75 000 USD dla stada liczącego 125 000 kur, w zależności od dominującej ceny rynkowej jaj w skorupkach i zapasów do wybicia. W 2010 roku, wkrótce po wprowadzeniu ostatecznej zasady FDA dotyczącej zapobiegania salmonelli, powszechna epidemia związana z jednym kompleksem w stanie Iowa doprowadziła do wycofania z rynku 500 milionów jaj. Przypadek ten był aberracją i wynikał z rażącego złego zarządzania i nie odzwierciedlał obecnych praktyk w branży. W przypadku wybuchu epidemii w 2010 r. początkowa runda testów pochodzących z audytów przeprowadzonych przez FDA z zastosowaniem metodologii FDA BAM wykazała wskaźnik infekcji na poziomie 2,5% badanych stad. Od tego czasu wskaźnik ten spadł do nieistotnego poziomu. Od 2011 roku nie zgłoszono żadnych przypadków SE przypisywanych jajom. Wynika to ze starannego przestrzegania zasad ostatecznej reguły FDA i opiera się w dużej mierze na częstotliwości i intensywności monitorowania środowiska. Nie byłoby to możliwe bez zastosowania testu RapidChek® SELECT™ SE, który jest używany przez komercyjne i stanowe laboratoria do przeprowadzania badań przesiewowych i testów zgodności dla przemysłu. Dowody epidemiologiczne wskazują, że zakażenie SE w przemyśle drobiarskim jest obecnie związane z mięsem brojlerów, a izolaty SE stanowią coraz większy odsetek serotypów Salmonella odzyskanych z mycia tusz. W związku z tym stosowane są programy ograniczania i eliminacji, a zestaw SE jest preferowaną techniką badań przesiewowych w stadach rodzicielskich i rosnących w amerykańskim przemyśle brojlerów.